Sažetak | Krvotvorene matične stanice (KMS) nalaze se u koštanoj srži i od njih nastaju zrele i funkcionalne krvne stanice. Osim koštane srži izvor KMS može biti krv iz pupkovine koja sadrži visoko vrijedne matične stanice, te periferna krv koja sadrži vrlo mali broj CD34+ stanica u homeostazi. Vađenje koštana srž kao tradicionalnog izvor KMS provodi se u operacijskoj sali, pod općom anastezijom, višestrukim punkcijama sjedene kosti. Transplatacijom KMS liječe se zloćudne krvotvorne bolesti,i prirođene imunosne bolesti. U slučaju alogenične transplantacije, darivatelj može biti član obitelji, najčešće sestra ili brat, ali i osoba s kojom bolesnik nije u srodstvu, ali se podudaraju u antigenima tkivne podudarnosti (HLA). Prije same obrade pripravka koštane srži potrebno je provesti kontrolu kvalitete pripravka. Kontrola kvalitete pripravka KMS mora obuhvaćati testove za procjenu učinkovitosti i sigurnosti staničnih pripravaka te testove za nadzor kvalitete postupka prikupljanja, obrade i pohrane stanica. Koštana srž se može infundirati bez daljnje obrade samo kada su darivatelj i primatelj iste ABO krvne grupe. KMS koje su sposobne uspostaviti funkciju krvotvornog sustava nalaze se u frakciji mononuklearnih stanica koštane srži. Obradom koštane srži izdvajaju se mononuklearne stanice i smanjuje se količina nepodudarnih eritrocita ili plazme te učestalost neželjenih reakcija. Obrada koštane srži se može učiniti ručno nakon centrifugiranja pripravka ili automatizirano staničnim separatorima (Cobe 2991, Spectra Optia, Sepax). Postupkom obrade cilj je izdvojiti ≥ 90 % CD34+ stanica, ≥ 90 % CD3+ stanica i ukloniti ≥ 90 % eritrocita. Cilj rada je bio retrospektivno analizirati postupke obrade koštane srži staničnim separatorom Spectra Optia u Kliničkom zavodu za transfuzijsku medicine i transplatacijsku biologiju. U razdoblju od lipnja 2018. do svibnja 2019. godine zbog nepodudarnosti u ABO krvnim grupama bolesnika i darivatelja učinjeno je 15 obrada koštane srži. Obrada koštane srži provodila se staničnim separatorom Spectra Optia, postupkom BMP (engl. bone marrow processing) kojim se izdvaja sloj leukocita, a uklanjaju eritrociti i plazma. U našem radu Spectra Optia se pokazala kao učinkovita i funkcionala tehnologija prilikom odvajanja nepodudarnih eritrocita jer je medijan volumena eritrocita prije obrade bio 327,3 mL (96-554mL), a nakon obrade je medijan volumena eritrocita u pripravku koštane srži smanjen na 10,8 mL (4,2-40,5mL). Medijan učinkovitosti smanjenja eritrocita iznosio je 95,8% (75,2-98,4%), a smanjenje volumena plazme 74,9% (58,9-84%). Medijan učinkovitosti izdvajanja CD34+ stanica, najvažnijeg aktivnog sastojka transplantata KMS , iznosila je 97,5% (76-130%), a CD3+ stanica 103,9% (59,8-151%), što ukazuje da su nakon obrade u transplantatu preostale gotovo sve krvotvorne i imunosne stanice. Prednost obrade Spectra Optiom pred ručnom obradom je što se izdvajanje stanica provodi u zatvorenom sustavu bez probijanja sterilne barijere, što smanjuje mogućnost mikrobiološke kontaminacije pa su tako i u našem istraživanju svi uzorci koštane srži poslije obrade ostali sterilni. Obrada koštane srži staničnim separatorom Spectra Optia pokazala se učinkovita u izdvajnju CD34+ stanica i CD3+ stanica kao i uklanjanju ertirocita i plazme što je potvrdilo funkcionalnost, automatizaciju i robusnost staničnog separatora Spectra Optia u obradi ABO nepodudarne koštane srži za potrebe transplantacijskog liječenja. |